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山東液相色譜系統(tǒng)的固定相和分離條件的選擇

點擊次數(shù)：1619 更新時間：2018-08-24
山東液相色譜系統(tǒng)與試樣預處理技術相配合，HPLC 所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
 
山東液相色譜系統(tǒng)固定相：
1、載體：
（1）表面多孔型載體：由直徑為30～40um的實心玻璃球和厚度為1～2um的多孔性外層組成。
（2）全多孔型載體：由硅膠和硅藻土等材料制成的直徑為30～50um的多孔型顆粒。
（3）全多孔型微粒載體：由納米級的硅膠微粒堆積而成，又稱堆積硅珠。載體粒度為5～10um，由于顆粒小，所以柱效高，是目前使用廣泛的一種載體。
2、固定液：
采用化學鍵合固定相。
3、柱填充技術：
（1）干法填充：適合直徑大于20um的填料。
（2）濕法填充：高壓勻漿填充。
 
山東液相色譜系統(tǒng)分離條件的選擇
一、減小柱內展寬：
1、固定相：選用粒徑小、分布均勻的球形固定相。化學鍵合相，勻漿法裝柱。
2、流動相：選用低粘度的流動相，有利于增大組分在溶劑中的擴散系數(shù)，減少傳質阻力。
3、流速：約1mL/min。
4、柱溫：25℃左右。
二、減少柱外展寬：
1、柱前展寬：主要由進樣引起，減小進樣器的死體積。
2、柱后展寬：主要由接管、檢測器流通池體積和檢測器響應時間等引起。